产品货号:
GS0056
中文名称:
植物基因组DNA抽提试剂
英文名称:
Bzup Plant gDNA Isolation Reagent
产品规格:
25mL|100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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Bzup Plant是通过高pH条件下的胍盐等离液剂和变性剂将植物组织一步裂解,并水解RNA,再经过乙醇沉淀即可快速得到基因组DNA。
本制品主要用于从植物中提取基因组DNA,抽提出的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。操作快速简单,无需水浴,全过程可在30分钟内完成。适用范围广,可用于DNA小量提取,也可用于大量提取DNA。
组分 | 25mL | 100mL |
Bzup Plant Reagent | 25mL | 100mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:未开启的试剂可以于室温保存,有效期见包装,4℃保存时间更长。
Bzup Plant中含有强腐蚀性化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
小型高速离心机(最大离心力≥ 12000×g)、1.5mL离心管、无水乙醇、氯仿、75%乙醇、8mM NaOH溶液等。
- 植物样品的裂解:取50~100mg植物组织用液氮研磨成粉末,加入0.3mL Bzup Plant,震荡混匀,室温放置5~10min至完全裂解。
- 取样过多会影响提取DNA的质量。如需抽提大量的DNA,可根据植物组织的用量相应增加Bzup Plant的用量。
- 加入Bzup Plant后,一定要充分震荡至溶液中无明显组织团块。
- 取样过多会影响提取DNA的质量。如需抽提大量的DNA,可根据植物组织的用量相应增加Bzup Plant的用量。
- 加入0.3mL氯仿,充分混匀,室温下静置5min。
- 混匀时不能剧烈震荡,否则会导致基因组断裂。
- 离心:10000rpm室温离心10min,将上清(约225μL)转移到新的1.5mL离心管中。
- 此步去除不溶的组织碎片和水解的RNA等杂质。
- 沉淀:加入225μL无水乙醇,颠倒混匀5~8次,室温放置2~3min,如有DNA沉淀产生,用移液枪头将沉淀的DNA挑取到新的1.5mL离心管中。若无法挑取,8000rpm室温离心5min,弃上清。
- 漂洗:加入1mL 75%乙醇,颠倒漂洗1~3min,12000rpm离心2min,弃上清。再重复此步骤一次。
- 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
- 晾干:开盖室温倒置5~10min至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略,否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 如果残留的乙醇有挂壁现象,倒掉液体后再短暂离心,将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5~10分钟至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略,否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 溶解:得到的DNA用8mM NaOH溶解。加入8mM NaOH充分溶解后若有不溶物,12000rpm离心2min,取上清。
提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。- 通常从50mg植物组织中提取的DNA可用50~100μL 8mM NaOH溶解。
- 提取的DNA可能有少量RNA污染,一般不影响使用。如需去除RNA,可向DNA溶液中加入RNase A去除。
- 8mM NaOH易吸收空气中的CO2,配制时间应在一个月以内。
- 8mM NaOH也可以用TE Buffer或水代替。
- 通常从50mg植物组织中提取的DNA可用50~100μL 8mM NaOH溶解。
- 中和:按每1mL用8mM NaOH溶解的DNA溶液加入100μL的比例加入0.1M HEPES(free acid)溶液将该DNA溶液pH调节至8.0附近。
- 如果使用TE buffer溶解DNA则不需要该步骤。
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